二氧化碳培養(yǎng)箱各個(gè)控制方面的技術(shù)

　　高溫干熱空氣滅菌是到現(xiàn)在為止世界公認(rèn)的最管用的滅菌技術(shù)，能徹底消泯全部微有生命的物質(zhì)污染源(涵蓋耐高溫的芽孢桿菌);濕熱滅菌一般用于高壓蒸汽滅菌中，比較少用在CO2培養(yǎng)箱上，濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法，煮沸的水溫普通至少需為100℃，球菌蕃息體煮沸5分鐘被殺害，但芽胞常需煮沸2鐘頭以上才可被殺害;紫外燈映射法的管用性受眾多因素影響，如遮攔、時(shí)間、強(qiáng)度、映射距離，濕潤(rùn)程度等，滅菌效果很保不住證;消毒劑揩拭法是對(duì)外表滅菌的辦法，適應(yīng)于平整的外表按實(shí)際情況驗(yàn)臺(tái)面，而箱體內(nèi)里預(yù)設(shè)的死角兒、各種部件因沒(méi)有辦法揩拭等因素造成滅菌效果也很有限，并且含氯、碘的消毒劑對(duì)于不銹鋼有腐蝕效用，不可以對(duì)不銹鋼箱體施行揩拭滅

　　到現(xiàn)在為止，二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術(shù)主要有干熱、濕熱、紫外燈映射、消毒劑揩拭等。

　　非同種細(xì)胞：即細(xì)胞交錯(cuò)污染，因?yàn)榧?xì)胞培育操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器具材料和溶液沒(méi)有嚴(yán)明分開(kāi)，往往會(huì)使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。到現(xiàn)在為止，天底下已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染，以致很多實(shí)驗(yàn)宣布失效。

　　支原體：支原體污染后，由于他們不會(huì)使細(xì)胞失去生命可以與細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)期并存，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)普通不發(fā)生混濁，細(xì)胞無(wú)表面化變動(dòng)，外觀(guān)上給人以正常感受，其實(shí)細(xì)胞已經(jīng)遭受各方面潛伏影響，如引動(dòng)細(xì)胞變型，影響DNA合成，制約細(xì)胞成長(zhǎng)等，往往被大部分?jǐn)?shù)實(shí)驗(yàn)者不重視。

　　真菌(霉菌和釀母菌菌)：真菌成長(zhǎng)的比較慢，不象球菌那末容易被發(fā)覺(jué)，不過(guò)一朝發(fā)覺(jué)有它的存在細(xì)胞就被污染了;到現(xiàn)在為止沒(méi)有好的制約辦法，涵蓋如今常用的兩性霉素，一朝污染容易反反復(fù)復(fù)爆發(fā)，特別胞子很難殺滅。

　　病毒：因?yàn)椴《炯纳�保存生命，爆發(fā)后盡量加快和正常細(xì)胞隔離，拋棄處置，相對(duì)來(lái)說(shuō)容易處置，對(duì)操筆者要挾較大;盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培育，但出產(chǎn)疫苗是不安全的。因?yàn)檫@個(gè)，潛伏病毒是細(xì)胞數(shù)量多出產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制劑制造中的困難的問(wèn)題。

　　球菌：球菌污染后，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)1-2天便會(huì)變色，對(duì)細(xì)胞成長(zhǎng)影響表面化，應(yīng)迅疾將污染細(xì)胞與其他細(xì)胞系隔離，滅菌后拋棄，還要用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培育盛器和超凈臺(tái)。

　　對(duì)于細(xì)胞來(lái)說(shuō)，十分理想的培育背景一樣也適應(yīng)這些個(gè)污染物的保存生命，培育箱本身是不會(huì)鑒別的，而細(xì)胞培育中大多時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi)，因?yàn)檫@個(gè)箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌十分關(guān)鍵!

　　二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源：球菌、真菌(霉菌和釀母菌菌)、病毒、支原體、非同種細(xì)胞。

　　因?yàn)檫@個(gè)，以上污染一朝發(fā)生，細(xì)胞最終基本只能拋棄，實(shí)驗(yàn)沒(méi)有辦法挽救，對(duì)于很多抽樣艱難的實(shí)驗(yàn)虧損沒(méi)有辦法改變!

　　在有生命的物質(zhì)活體內(nèi)，有生命的物質(zhì)體有自身的抵抗力系統(tǒng)盡力照顧細(xì)胞或團(tuán)體，不過(guò)在體外培育時(shí)，沒(méi)有不論什么盡力照顧自個(gè)兒的抵抗力屏障。對(duì)于碳酸氣培育箱的基本參變量溫度、CO2和濕潤(rùn)程度，大部分?jǐn)?shù)培育箱都能滿(mǎn)意研討實(shí)驗(yàn)的需求。不過(guò)，針對(duì)培育過(guò)程中面對(duì)的各種污染源，各品牌二氧化碳培養(yǎng)箱的扼制形式和效果不盡相同，因?yàn)檫@個(gè)細(xì)胞體外培育中最大的要挾其實(shí)是污染問(wèn)題。

　　二氧化碳培養(yǎng)箱是經(jīng)過(guò)在培育箱箱體內(nèi)摹擬形成一個(gè)大致相似細(xì)胞/團(tuán)體在有生命的物質(zhì)體內(nèi)的成長(zhǎng)背景如牢穩(wěn)的溫度(37°C)、牢穩(wěn)的CO2水準(zhǔn)(5%)、永恒固定的酸堿度(pH值：7.2-7.4)、較高的相對(duì)濕潤(rùn)程度(95%)，來(lái)對(duì)細(xì)胞/團(tuán)體施行體外培綿羊裝置。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、團(tuán)體培育和某些特別微有生命的物質(zhì)的培育，常見(jiàn)于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研討、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的使聚在一起、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研討和出產(chǎn)、培育雜交瘤細(xì)胞出產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細(xì)胞、團(tuán)體工程、藥物用篩子選等研討領(lǐng)域。