本標(biāo)準(zhǔn)適用于含乙醇的化妝品中甲醇含量的測定

　　1 方法提要

　　試樣直接或經(jīng)蒸餾后，以氣相色譜法進(jìn)行測試和定量(2)。

　　2 樣品采集

　　見GB7917.1-87《化妝品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 汞》第2章。

　　3 試劑

　　3.1 甲醇(99.5%)：分析純。

　　3.2 無甲醇乙醇：取1.0?l注入色譜儀，應(yīng)無雜峰出現(xiàn)。

　　3.3 GDX-102(60～80目)：氣相色譜試劑。(3)

　　3.4 甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液：取甲醇2.5ml，置于預(yù)先注入95ml水的100ml容量瓶中，然后加水至刻度，混勻備用。此溶液為2.5%甲醇溶液。

　　3.5 氯化鈉：分析純。

　　3.6 消泡劑：乳化硅油。如284PS，上海樹脂廠出品(4)。

　　4 儀器

　　4.1 氣相色譜儀：具氫火焰離子化檢測器(5)。

　　4.2 色譜柱：玻璃柱或不銹鋼柱，規(guī)格2m×Ø4mm，內(nèi)填充GDX-102(60～80目)擔(dān)體(6)。

　　4.3 全玻璃磨口水蒸餾裝置：如圖。

　　4.4 微量進(jìn)樣器：0.5?L或1?L。

　　5 分析步驟

　　5.1 啟動色譜儀，進(jìn)行必要的調(diào)節(jié)，以達(dá)到儀器最佳工作條件。

　　色譜條件依具體情況選擇，參考條件為：

　　氣化溫度：190℃。

　　檢測器溫度：180℃。

　　柱溫：170℃。

　　氮?dú)饬魉伲?0ml/min。

　　氫氣流速：40ml/min。

　　空氣流速：500ml/min。

　　進(jìn)樣量：1?l。

　　5.2

　　樣品預(yù)處理：液體或低粘度樣品，且甲醇含量較高時，可取10ml試樣，加無甲醇乙醇(3.2)至總體積為50ml，必要時可過濾，作為樣液備用。甲醇含量低的花露水等，也可不經(jīng)稀釋直接測定。樣品粘度較大，無法直接測定，可以取10g試樣，置于蒸餾瓶中(如圖)，加50ml水、2g氯化鈉(3.5)、必要時加1滴消泡劑(3.6)，再加30ml無甲醇乙醇(3.2)，在沸水浴中蒸餾，收集約40ml蒸餾液于50ml容量瓶中，冷至室溫后，加無甲醇乙醇(3.2)至刻度，作為樣液(7)。

　　5.3 測定

　　取50ml容量瓶四只，分別注入1.00、2.00、3.00、4.00ml甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(3.4)，然后分別加入無甲醇乙醇30ml，并分別加水至刻，此標(biāo)準(zhǔn)序列含甲醇為：0.05%、0.10%、0.15%、0.20%。

　　依次從各容量瓶取1?L標(biāo)準(zhǔn)注入氣相色譜儀，記下各次色譜面積，并繪制峰面積-甲醇濃度(V/V)曲線。

　　取5.2制備的樣液1?L,注入氣相色譜儀,記錄色譜峰面積,并從標(biāo)準(zhǔn)曲線查出對應(yīng)的甲醇濃度(8)。

　　6 分析結(jié)果的計(jì)算

　　按下式計(jì)算甲醇濃度：

　　甲醇(%，V/V)=P/K

　　式中：P───從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣液甲醇濃度，%;

　　K───樣品稀釋系數(shù)，如按本方法稀釋系數(shù)為10/50樣品經(jīng)蒸餾處理時，也視稀釋系數(shù)為10/50。

　　附加說明：

　　本標(biāo)準(zhǔn)由中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測所歸口。

　　本標(biāo)準(zhǔn)由“化妝品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法”起草小組負(fù)責(zé)起草。

　　本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人沈文、鄭星泉、陳辰。

　　本標(biāo)準(zhǔn)由中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測所負(fù)責(zé)解釋。

　　注解：

　　(1)甲醇(又名木醇或木酒精)主要經(jīng)呼吸道和胃腸道吸收，皮膚也可部分吸收。甲醇吸收至體內(nèi)后，可迅速分布在機(jī)體各組織內(nèi)，其中以腦髓液、血、膽汁和尿中含量最高 ，眼房水和玻璃體中的含量也較高，骨髓和脂肪中最低。甲醇有時顯的蓄積作用，未被氧化的甲醇經(jīng)呼吸道和腎臟排出體外，部分經(jīng)胃腸道緩慢排出。甲醇在體內(nèi)主要被醇去氫酶(debynogenase)氧化，其氧化速度是乙醇的1/7，最后代謝產(chǎn)生為甲醛和甲酸。近年研究表明，甲醇在體內(nèi)抑制某些氧化醇系統(tǒng)，抑制糖的需氧分解，造成乳酸和其它有機(jī)酸積累，從而引起酸中毒。

　　甲醇主要作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，具有明顯遙麻醉作用，可引起腦水腫，對視神經(jīng)及視網(wǎng)膜有特殊選擇作用，引起視神經(jīng)萎縮，導(dǎo)致雙目失明。

　　甲醇的皮膚吸收采用猴子等進(jìn)行研究，推測人吸收30ml甲醇有危險(xiǎn)。急性毒性：

　　LD50(口服) 人：1400mg/kg

　　LD50(吸入) 人：4000ml/L

　　因?yàn)榧状级拘暂^強(qiáng)，故化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB7916-87)規(guī)定甲醇為禁用物質(zhì)�；瘖y品中含有的甲醇雜質(zhì)含量不得大于0.2%(V/V)。

　　(2)檢驗(yàn)化妝品中甲醇的方法有氣相色譜和分光光度法。前者準(zhǔn)確、快速、靈敏度高，是首選方法。

　　(3)GDX-高分子多孔微球是一種人工合成的新型固定相，還可以作為擔(dān)體涂漬固定液。它由苯乙烯(STY)和二乙烯苯(DVB)或乙基乙烯苯(EST)與二烯苯聚合而成。聚合物若為非極性(STY)與極性基團(tuán)的化合物聚合，則形成極性聚合物。其優(yōu)點(diǎn)是：

　　(a)具有較大的比表面卻無吸附活性中心。因而極性組分也能獲得正態(tài)峰。

　　(b)無流失現(xiàn)象，柱壽命長。

　　(c)對強(qiáng)極性化合物(醇、酮等)有較好的分離能力，并且有較強(qiáng)疏水性能，特別適用于分析混合物中微量水分。

　　(d)具有耐腐蝕性，可用于有腐蝕性的樣品分析;但不能分析二氧化氮，因與其反應(yīng)，使固定相變質(zhì)。

　　(e)熱穩(wěn)定性好。最高使用溫度200～300℃。

　　(f)具有吸附、分配及分子篩三種作用，因而分離能力好。

　　(g)柱過負(fù)荷后，恢復(fù)快，不適用于制備色譜。

　　(4)消泡劑種類很多，此處所用系硅高分子化合物，乳化硅油284PS是甲基乙氧基硅烷(30～33%)與硅脂、聚乙烯醇加水至100的混合物。適合于含水樣品的消泡。凈化的248PS，其色譜圖在甲醇保留時間范圍內(nèi)沒有雜峰。

　　(5)氫火焰離子化檢測器(FID)，具有靈敏度高、死體積小、應(yīng)答時間快、定量線性范圍寬、結(jié)構(gòu)簡單、操作穩(wěn)定、對溫度不靈敏、不需要置于控制溫度的恒溫箱中等特點(diǎn)。由于它靈敏度高，對載氣的純度要求也較高，對永久性氣體、水、甲酸、甲醛、二硫化碳等無應(yīng)答。在使用(FID)檢測器時應(yīng)注意：

　　(a)載氣、氫氣和空氣必須很好凈化。

　　(b)為了使離子化訊號不受載氣或氫氣流速的影響，應(yīng)從實(shí)驗(yàn)中找出適當(dāng)?shù)牧魉�，一般流速比為：載氣+氫氣=1+1或1+2，本方法氮?dú)饬魉?氫氣流速=40ml/min+40ml/min。一般空氣流速與氧氣流速是10+1，這樣可使信號不隨流速而改變。本方法空氣流速是500ml/min。

　　(c)要經(jīng)常保持離子頭清潔。

　　(d)要注意盡可能采用低蒸氣壓的固定液，防止固定液的流失引起基底電流和噪音的增大。

　　(e)樣品取量不能太多，特別是其中水分不能太多，否則會使溫度下降，影響靈敏度，有時甚至使火焰熄滅。

　　(f)屏蔽絕緣要好。

　　(g)要保持離子化室在適當(dāng)溫度，保持空氣流速相當(dāng)大，使燃燒生成的水有致冷凝并且及時排出。

　　(6)因?yàn)楦叻肿佣嗫孜⑶蛟诳諝庵屑訜嵋鬃冑|(zhì)，所以只能在裝柱后通載氣(N2、H2等)進(jìn)行動態(tài)老化至基線平直。另外高分子多孔微球易產(chǎn)生靜電而影響裝柱，裝柱器具需用經(jīng)丙酮或乙醇潤濕的紗布擦拭。裝柱方法同氣-液填充柱。

　　(7)從目前國內(nèi)產(chǎn)品分析來看，絕大部分樣品無需蒸餾，可以直接進(jìn)樣。至于是否稀釋則需從含量來考慮。樣品結(jié)果應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線覆蓋范圍之內(nèi)。10g樣品一般加20ml水，粘度太大的樣品可加50ml。但含乙醇低于50%的樣品，可以少加一點(diǎn)(如20ml)。此處加氯化鈉是為電解質(zhì)破乳，并且使水相中含無機(jī)鹽，以利用甲醇蒸出。

　　(8)甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液0.05%、0.1%、0.15%、O.2%在103型GDX柱可以得到相應(yīng)的mV數(shù)為0.85、1.50、2.34、2.98，保留時間約為40～100s。線性關(guān)系良好，此法回收率在95%以上，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在5%以下。